(一)实验动物的弃取真实迷奸女高中生

对实验动物的弃取包括种属、品种、品系、性别、规格[年齿和(或)体重]等基本内容，偶然，磋议还对动物的生理状态作出特殊规定，如使用妊娠动物、临产动物等，如果使用的是圭臬化的实验动物，还要细则动物的生物学净化等第。弃取动物的一般要领是当先需细则种属、品种、品系，然后接洽性别、规格、生理，状态、净化等第等具体要求。弃取实验动物应辞退实验动物应用准则。

1.实验动物应用准则  生命科学磋议中，对实验动物的应用必须辞退科学(science)、伦理(ethic)和经济(economy)三个准则，简称“实验动物应用的SEE准则”。动物实验磋议必须在SEE准则的率领下，对组成动物实验的一系列磋议因素如动物、材料与方法、实验本领、开导与环境等进行正确弃取和设置。

(1)科学准则：实验动物科学准则(science criterion of laboratory animals)是指总共这个词动物实验的有盘算想象和实施经过必须合乎科学规定，具体到动物、方法、本领、环境等要素都必须与实验目的匹配，这是细则动物实验有盘算时最基本的准则。科学准则不仅涵盖了弃取动物时的相似性原则、特殊性原则、圭臬化原则，而且包括了对动物数量、性别、年齿、体重、生理状态等一般要求的接洽，对实验的日夜、季节、周期、分组、对照、不雅察盘算的细则，动物的饲育环境、养分供给、质地贬抑，以及动物实验中饲育握住、实验本领、不雅察方法的弃取与实践等方面的全面内容。

动物实验中，动物、方法、本领和环境组成了密切关联的全体，除了弃取合乎实验目的动物之外，与动物和实验目的相匹配的磋议方法，与动物及操作主说念主员相匹配的本领、与动物和实验要求相匹配的环境等都是实验获胜必不可少的部分。在明确磋议目的后，各项磋议要素和要求与之匹配程度越高，实验的获胜率就越高。执行科学准则的意旨在于为总共这个词磋议奠定科学的基础，确保磋议收尾的准确性、可靠性、重复性，前提是透顶剖释磋议目的，况兼掌持相干匹配所要求的布景常识。

(2)伦理准则：实验动物伦理准则(ethic criterion of laboratory animals)是指东说念主说念地使用实验动物，这是科学磋议者必备的基本修养。动物实验磋议必须辞退“健康、自得、有益”的实验动物福利3H宗旨，在科学磋议和尊更生命的天平上取得最好平衡，为此，磋议者应照顾动物在磋议中遭遇的灾难和不适，充分诈欺各项动物实验常识和本领，尽量幸免对动物不必要的伤害，如适当地使用药物免除动物的难熬和焦虑，掌持并熟练实施范例的动物操作本领，为动物提供合适的环境和顾问、实验前充分评估对动物身心的伤害程度并细则应答办法等，磋议许可的情况下，用低等生物替代高级动物，用非生命磋议妙技替代活体动物磋议均是伦理准则的体现。

在动物实验中体现东说念主说念主义有着科学和东说念主文的双重涵义。从科学的角度，动物在得到东说念主说念对待时，对实验因素的反应受到的骚动更小，从而更趋近真实情状，磋议收尾的确凿度就高；从东说念主文的角度，懂得善待动物的东说念主更懂得尊更生命和当然，这是东说念主类文静发展的宗旨。

(3)经济准则：实验动物经济准则(economy criterion of laboratory animals)是指动物实验的想象和实施均应体现对资源的量入为出与合理利用。如药物耐久毒性磋议中的非啮齿类动物平素可用犬或者猴，由于猴的开首珍稀且饲育难度大，保管资本高，犬则开首较无为，饲育也相对容易得多，因此当磋议允许时，使用犬可减少东说念主力、动力和材料的消耗，并有助于保护猴这一物种。

经济准则也体现时时辰上。通过对动物和方法等的弃取缩小磋议周期，故意于加速研发程度，并减少较长磋议周期中多样不细则因素对磋议的骚动，如避孕药的磋议周期和动物妊娠期密切相干，使用妊娠期较短的动物不错缩小避孕药磋议周期，加速药物研发程度。

在确保磋议质地的前提下，弃取开首饱和、易于饲养的动物，弃取下里巴人的方法，弃取实验周期较短的有盘算，弃取熟识的、对开导依赖性低的本领，弃取能耗低的开导等，都是经济准则的体现。

2.动物遗传布景的弃取  对实验动物遗传布景的弃取是指对种属、品种、品系的弃取，和实验目的匹配是弃取的紧要原则，亦然科学准则的体现，匹配时主要接洽相似性、特殊性、动物寿命和圭臬化程度等方面，匹配与否径直关系到磋议的成败。其次，接洽在不影响磋议成果的前提下弃取更合乎东说念主说念和更经济的动物。如实验可能酿成非磋议需要的剧烈难熬时，接洽弃取对难熬明锐性较差的动物；当两种动物都可用于淹没磋议而不会产生相反很大的收尾时，就应使用开首更无为的那种动物。

(1)按相似性匹配：相似性是指实验动物和宗旨动物(比喻东说念主)在结构、功能、反应特征上相似。大多数动物实验的目的是通过受试动物的反应瞻望处理因素对宗旨动物的作用，因此实验收尾平素都要外推到宗旨动物身上，当两者的相似程度越高，则收尾外推的准确率也越大，相似性经常是弃取动物时当先接洽的因素。按相似性匹配主要接洽剖解和组织结构、生理反应、代谢经过、疾病特征等方面。

东说念主处于进化树的最高端，总体上，动物的进化程度越高，和东说念主类的全体相似度就越大，如猕猴、猩猩等非东说念主灵长类动物在生物学、行为学上有广博和东说念主类相似的特征，对特定实验因素的反应周边，东说念主类的一些传染性疾病如结核等只可在非东说念主灵长类动物中进行实验性感染磋议，在转基因乙肝小鼠磋议获胜前，狒狒是独一的东说念主类乙肝动物模子，意志、行为和基础神经磋议中仍广博使用和东说念主类有最至亲缘关系的非东说念主灵长类动物。但有些时候，进化程度不高的动物可能在某些特定方面具有和东说念主类的高度相似，如猪的皮肤和东说念主类皮肤的组织结构相似，体表毛发的疏密、表皮厚薄也近似，而不似猴那般多毛，猪的上皮开导再素性与东说念主相似，烧伤后内分泌与代谢的转换也近似，是以比猴更适合用于东说念主类烧伤的磋议。用啮齿类、兔等动物制作的疾病动物模子尽管在进化上远低于非东说念主灵长类，但这些动物局部所反馈出的与东说念主类相似的疾病经过和临床发达与这些疾病的磋议要求相符，恰是由于广博利用局部相似性，东说念主类才可能使用多样实验动物开展无为的磋议。

当然弃取形成的动物和东说念主类的相似度有限，为此在种的基础上阐明特定需求扶助了不同品种和品系的实验动物，如顽固群、近交系、杂交F1代，系统杂交动物及开首于多样布景品系的突变动物和转基因动物。这些动物具有东说念主为创造或保留的和东说念主类相似的性格，从而丰富了东说念主们弃取动物的开首。顽固群动物具有和东说念主类群体相似的遗传异质性，适合东说念主类遗传磋议、药物筛选和毒性试验，近交系、杂交F1代，系统杂交动物、突变动物和转基因动物好多都是东说念主类疾病的动物模子，不错再现某些东说念主类疾病的特征，成为磋议这些疾病的理思材料。

(2)按特殊性匹配：特殊性是指实验动物非凡的结构、功能和反应，这些性格和宗旨动物有很大相反，以致是宗旨动物所不具备的，但诈欺这些性格不错简化磋议责任，普及实验获胜率等。

一些动物特殊的躯壳构造可为实验磋议带来许多便利，如长爪沙鼠的脑底动脉环后交通支缺损，弗成组成Willis动脉环，因而在脑缺血磋议中可简易地进行自身对照；犬的甲状旁腺位置固定且位于甲状腺名义，适合于甲状旁腺摘除术相干磋议；豚鼠的胸腺全部位于颈部，容易手术摘除，在磋议胸腺功能时十分有用；家兔胸腔中的纵隔将胸腔分为左、右不重迭的两部分，在需要开胸的磋议中如果不损坏纵隔，不错不使用呼吸机。

使用对实验因素明锐性高的动物大致更好地达到实验目的，如家兔易产生发烧反应，且发烧典型、恒定，很适合用于发烧、解热和热原搜检等与体温相干的磋议；大鼠的垂体-肾上腺功能发达，应激反应明智，常用于机体应激反应磋议；大鼠踝要道对致炎因子很明锐，故适合多发性要道炎的磋议。

动物的特殊反应往往成为磋议的故意要求，如兔和猫是典型的刺激性排卵动物，适合于遏制排卵的避孕药磋议；豚鼠体内弗成合成维生素C，必须从食品中接管，通过贬抑饮食中维生素C的含量就可进行相应败落症的磋议；大鼠的肝脏具有庞大的再生本事，切除60％～70％肝叶仍可再生，适合肝外科的磋议。

(3)寿命的匹配：实验动物的寿命必须比磋议周期长，才能不雅察到实验的极端，这关于一些耐久实验磋议如慢性毒性实验极端焦虑。对所需寿命的估量应不小于实验周期加上能用于实验的动物最小年齿(或日龄)。常用实验动物寿命见表3-1-2。

(4)不同种属的圭臬化程度：圭臬化的实验动物具有明确的遗传布景和微生物学布景，依赖于熟识的养分贬抑和饲养环境贬抑本领，其开首明晰，布景贵府都全，健康情状明确，是实验动物中的“圭臬件”，应用圭臬化的实验动物，不仅故意于抹杀来自实验动物自身和环境的各样磋议骚动因子(准确性要求)，也故意于磋议收尾的横向和纵向比较(重复性要求)。要求允许时，应选用还是圭臬化的实验动物种属开展实验。现时，我国的圭臬化实验动物有大鼠、小鼠、豚鼠、兔、地鼠、犬和猴，其中，大鼠和小鼠的圭臬化程度最高，对犬、猴等动物的应用还存在圭臬化动物和非标动物并存的情况，在一些地区还是缔造了实验用猪的方位圭臬，实验用猫现时还莫得圭臬。

3.动物性别的弃取  选用和宗旨动物相易的性别，即性别一致，是性别匹配的基本要求。经营生养磋议中，平素大致明确该磋议针对男性或者女性，从而弃取相应性别的动物；肿瘤磋议中，子宫癌、卵巢癌等磋议必定弃取雌性动物。但多数磋议的宗旨动物包括两性，此时需要阐明实验反应的性别相反和磋议的具体情况来决定使用何种性别的实验动物。

当已知处理效应无性别相反而磋议对性别要求又莫得明确规定时，平素优先选用雄性动物，这是接洽到雌性动物在性周期不同阶段以及妊娠、授乳等特殊生理状态下的机体反应性有较大转换，可颖悟扰磋议；当实验反应的性别相反仅体现时量的方面，如骨髓微核试验中雄性小鼠比雌性小鼠对引诱微核更明锐，则使用雄性，而如果已知性别导致实验反应有质的别离，则应同期弃取两种性别；如需发现和分辩细则实验刺激对2种性别的不同作用，如不同的LD50平素应同期使用2种性别动物且数量极端；如果已知某个性别的特殊反应答磋议可能酿成骚动时，就应规避这个性别，举例对动物神经内分泌的磋议需要幸免雌性动物性周期导致的激素水平波动，不错仅用雄性动物进行磋议。

4.动物年齿的弃取  磋议中，使用和宗旨动物一致的年齿以取得最可靠的收尾。当一项磋议的预期外推对象莫得特定年齿规定时，如多数药物都可针对各年齿段的东说念主群，则使用性熟识的青丁壮动物，实践表现注解如斯弃取大致自尊大多数磋议的需求。关于磋议周期较长的实验，可适当使用幼龄动物，以确保不雅察到实验的极端。

年齿匹配的依据在于，不同庚齿个体的生物学相反不仅体现时剖解生理特征上，如外不雅、剖解结构、腺体分量等，也体现时多样生物学功能上，如滋长速率、发育水平、熟识度、脏器功能和古老程度等，并由此导致对淹没实验刺激的不同反应。幼龄动物解毒系统多发育不十足，如2周龄以上的家兔肝脏才具备解毒功能，况兼在4周龄后才能达到成年兔水平，而大鼠的葡萄糖醛酸转化酶约在诞生后30天达到成年大鼠水平，老龄动物解毒功能则发生退化，因此不同庚齿对毒物的明锐性一般措施是年少>老年>成年，大鼠或小鼠对乙烷、汽油、二氯乙烷的明锐性从大到小的措施均为年少>老年>成年。

由于不同种属的动物有着不同的寿命和发育特色，在不同种属间的“年齿一致”是指两者间的年齿对应，即生物学时辰上的“同步”，而非天文体时辰上的“极端”。如小鼠的一般寿命为2.5年，而东说念主类的寿命约70年，那么1只2岁多小鼠对实验的反应可能是1个70岁的东说念主类才会发生的。由于不同种属在生命各个阶段发育速率不一致，也弗成粗略地将两种动物按寿命进行等距对应以推算“一致”的年齿，不然，按照16岁的犬相配于80岁的东说念主来推论，就会出现1岁的犬相配于5岁的东说念主的论断，事实上1岁的犬对应15岁的东说念主类。是以除了寿命之外，年齿对应还必须接洽不同种属的年齿阶段对应，实质上是动物在各年齿阶段的滋长发育特色对应。

犬和东说念主类的年齿对应关系见表3-1-3。

图3-1-1表现了东说念主和常用实验动物在年齿及生命周期上的对应关系。

5.动物体重的弃取  体重弃取本色上是年齿弃取。体重是一个和年齿有一定相干性的生物量。要取得实验动物的确切年齿，就必须准确纪录每个动物的诞寿辰期，这在规模化分娩的实验动物尤其是大鼠、小鼠、地鼠等小动物中是不现实的，但在特定情况下不错通过动物的体重推算其年齿，从而简化年齿匹配。

由于遗传因素细则后，体重和年齿的对应关系主要受到养分情状和饲养要求的影响，而圭臬化的实验动物具有较为均一的遗传布景、圭臬化的养分贬抑和饲养要求，其体重和年齿间的对应关系较为恒定，尤其在对数滋耐久具有精采的对应，因此町以阐明每个品种、品系的滋长弧线，将年齿弃取调节为较为粗略的体重弃取。但关于诞寿辰期不祥、遗传布景不清、饲养要求不和洽的动物则弗成作不异调节。

此外，淹没实验中，动物的体重应尽可能一致，体重的组内相反平素不得朝上10％。

6.动物生理状态的弃取  关于生理状态的匹配弃取等同原则，即阐明磋议所针对的生理状态弃取具有相易状态的动物。实验动物特殊生理状态主要指妊娠、授乳等，处于特殊生理状态中的动物各项功能和反应都与常态动物有很大别离，因此磋议中如莫得明确规定，应使用未尝交配的性熟识动物，幸免特殊生理状态的骚动。

7.动物净化等第的弃取  不同的生物学净化等第意味着不同的微生物学和寄生虫学布景，净化等第越高，则相应的布景骚动越小，关于圭臬化的实验动物，不错通过弃取生物学净化等第来放胆实验动物的微生物学、寄生虫学布景，从而自尊实验磋议的相干需求。阐明我国的实验动物国度圭臬(GB 14922.1-2001，GB 14922.2-2001)，将实验动物按生物学净化程度分为普通级动物、清洁级动物、无特定病原体(SPF)动物、无菌动物4个级别(表3-1-4)，其中清洁动物是阐明我国国情而建立的一个级别。在其他一些国度，则分为普通级动物、SPF动物、悉天真物和无菌动物4个等第，其SPF动物应抹杀的微生物和寄生虫与我国的清洁级动物和SPF动物均不同，从贬抑的严格程度而言，介于我国的清洁级动物和SPF动物之间。

对净化等第的弃取应当从实验目的起程，而非越高越好，因为许多微生物和机体存在共生关系，是机体保管健康和正常功能所必需的。在我国，现时无特定病原体(SPF)动物和清洁动物是最常用的两个等第。 SPF动物由于抹杀了东说念主畜共患病、动物烈性传染病、隐性感染和逃避感染、要求致病的病原而被称作“确凿的健康无病模子”，适用于大多数科学磋议，尤其在中期或耐久的磋议、一些免疫学磋议及生物成品的分娩和器官移植中，使用SPF动物可幸免大部分要求致病病原感染以及隐性感染、逃避感染的骚动；清洁级动物也被称作“无疾病症状的模子”，短期的、对动物佩戴微生物和寄生虫要求不严格的实验不错使用清洁级动物；普通级动物平素不必于认果真科学磋议，而用于教悔示范和预试。无菌动物和悉天真物则是一类超常的生态模子，仅用于照实有必要抹杀一切微生物的磋议，以及在此基础上磋议单一菌种对生物体的作用，或2种菌种在体内的相互作用等。

8.样本量的细则  速即间隙的大小与重复次数(样本含量)的平方根呈反比，重复越多，抽样间隙越小。样本所含的数量越大或重复次数越多，则越能反馈变异的客不雅真实情况。但若无尽的增多样本含量，将加大实验规模，蔓延实验时辰，糜费东说念主力物力，增多系统间隙出现的可能性。因此，正确估量一个实验的不雅察例数，是实验想象的焦虑内容。

进行样本含量估量要依据以往训戒、预实验或文件贵府所提供的参考数据。要事前细则的内容有：①所比较的两个总体参数间的差值δ，如δ=/μ1-μ2或π1-π2；②总体圭臬差σ，常以样本圭臬差S估量；③Ⅰ类作假的概率α，一般取0.05或0.01；Ⅱ类作假的概率β，常取0.10或0.20；④主办度即试验服从1-β，平素取0.80或0.90，一般不宜低于0.75，不然易出现假阴性收尾；⑤明确取单侧或双侧试验。α、1-β和δ需要阐明专科要求，由磋议者规定。

想象样本含量应以各组例数极端为前提，估量样本含量可通过查表(统计学家阐明连络有计划公式编制的样本含量便查表)，也不错通过公式有计划，底下先容假定试验中常用的几种样本含量估量方法。

(1)样本均数与总体均数(或配对)比较

方法1：按式有计划：

n=[(μα+μβ)S/δ]2

式中：n为所需样本含量，S为总体圭臬差的估量值，δ为原意间隙，μα和μβ由t界值表(ν=∞)查得，μα有单侧和双侧之分，μβ只取单侧值。

方法2：径直查配对比较(t试验)时所需样本例数表(统计学书本附表)，此表也可用于样本均数与总体均数比较的样本含量估量。

例3-1-1用某药调治矽肺患者，估量可增多尿矽排出量，其圭臬差为2.5mg/dl，若要求以α=0.05，β=0.20的概率，能辩别出尿矽排出量平均增多1mg/dl，问需用若干矽肺患者作念实验?

本例：δ=1，S=2.5，单侧α=0.05，U0.05=1.645，β=0.10，U0.10=1.282，代入公式，得

n=[(1.645+1.282)×2.5/1]2=53.5，取54

再以尝试法n=54，ν=54-1=53，查t界值表，得单侧t0.05，53=1.674。

n=[(1.674+1.282)×2.5/1]2=54.6，取55

即趋于沉稳。

查配对比较(￡试验)时所需样本含量表，单侧α=0.05，β=0.1，δ/σ=1/2.5=0.4，得n=55。与有计划收尾相易。故可以为需调治55例矽肺患者。即以55例进行实验，如该药确能增多尿矽排出量，则有90％(1-β)的主办可得出有别离的论断。

(2)两样本均数比较

方法1：按式有计划

n=2·[((μα+μβ)S/δ)]2

式中：n为每个样本所需例数，平素想象两样本例数极端，以普及统计效率；S为两总体圭臬差的估量值，一般假定其极端；δ为两均数的差值，μα和μβ的意旨同前。

方法2：径直查两样本均数比较(t试验)时所需样本例数表。

例3-1-2比较两种催眠药成果，服甲药后平均入睡时辰为40分钟，服乙药后平均入睡时辰为25分钟，两药入睡时辰合并圭臬差Sc为30分钟，若使两药别离具有统计学意旨(α=0.05，β=0.10)，认真实验需要若干只实验猕猴?

本例：δ=40-25=15分钟，Sc=30分钟，双侧α=0.05，U0.05=1.960，β=0.10，U0.10=1.282。代入公式，得

n=2×[(1.960+1.282)×30/15]2=84(只)

查两样本均数比较(t试验)时所需样本例数表，双侧α=0.05，1-β=0.90，δ/S=15/30=0.5，得n=84(只)。

与有计划收尾相易。

按上述公式算得的n是基于正态近似旨趣，一般较查表法(基于t试验旨趣)收尾偏少1～2例，有东说念主办法对上述收尾再加1～2例算作校正。

(3)两样本率比较

方法1：按式有计划：

n=(μα+μβ)2×2×p×q/(P1-p2)2

式中：n为两样天职别所需例数，P1和P2分辩为两总体率的估量值，P为两样本合并率，p=(P1+p2)/2，q为(1-p)，μα和μβ意旨同前。

方法2：径直查两样本率比较时所需样本例数表，单侧查两样本率比较时所需样本例数(单侧)表，双侧查两样本率比较时所需样本例数(双侧)表。

例3-1-3  某磋议者为磋议甲、乙两药调治冠心病效应的相反大小，初步得出甲药显效率为67％，乙药显效率为39％，问若使两药疗效别离有权臣性，α=0.05，β=0.1，认真实验时每组需要不雅察若干只具有该东说念主类疾病的动物模子?

本例：p1=0.67，p2=0.39，p=(0.67+0.39)/2=0.53，双侧U0.05=1.960，单侧U0.10=1.282，代入公式，得

n=(1.960+1.282)2×2×0.53×0.47/(0.67-0.39)2=67只

(二)实验要求的设置

实验要求是为动物实验磋议目的特地匹配的除动物之外的各项环境要求的总额，关于保险实验的获胜进行、实验收尾的科学性可靠性至关焦虑。实验中动物的生活环境十足由东说念主类贬抑，实验的环境要求不仅是动物实验经过中动物赖以活命的要素，亦然东说念主类贬抑磋议质地的盘曲。实验收尾，即动物对实验处理的反应在遗传性决定之后，主要受到环境因素的影响，且在数量性状上受环境的影响很大，环境圭臬化是动物实验圭臬化的焦虑内容，为此实验的环境和饲养要求必须与实验目的以及动物正确匹配。

1.实验设施环境  我国实验动物国度圭臬中，将动物实验设施的环境分为普通环境、樊篱环境、阻扰环境3类，不同的环境对应不同净化等第实验动物的饲养和实验不雅察，见表3-1-5。

高净化等第的动物弗成在“低等第”的环境内进行实验待养，如清洁动物弗成饲养在普通环境中，悉天真物弗成饲养在樊篱环境和普通环境中，不然该动物将被视作自动左迁至该环境中的最低等第，如无特定病原体动物饲养于普通环境中，就应算普通动物。左迁不仅导致了扶助高级第动物所耗资源的糜费，拒抗实验动物使用的“经济准则”，而且由于低等第的环境中存在更多致病微生物，高净化等第的动物往往败落对其的免疫力而更容易感染发病，引起生物安全问题。但进行短期的、急性的、无需动物存活的实验时，由于在较低等第环境中少顷停留一般不会对实验酿成彰着骚动，也不会给动物的健康和福利带来权臣影响和严重后遗症，则不错在较低等的环境中开展高级第动物的实验，其故意之处是量入为出开支和动力并戒指简化责任。

净化等第较低的动物不错饲养在较高级第的环境中，但其净化等第不会随环境类型而转换，普通动物饲养在阻扰环境中仍是普通动物，这么作念会普及实验资本况兼酿成资源糜费，不异拒抗实验动物使用的“经济准则”。如无极端需要一般不提倡。

樊篱环境和阻扰环境都可用于无特定病原体动物的实验，一般的实验不错在樊篱环境中开展，磋议中需要保种或对环境中微生物贬抑极其严格，如要求达到无菌水平，应弃取阻扰环境。

樊篱环境和阻扰环境都对应一种以上动物净化等第，但阻扰环境是由相互孤苦的阻扰安装已毕的，每个阻扰安装内仅容纳一种等第的动物，而樊篱环境却是由设置多样樊篱的建筑设施已毕，只是弃取“相互孤苦的房间”无法幸免空气和物品的交叉沾污，因此在樊篱设施内应只饲养清洁级动物或者SPF动物，如果必须将两种级别的动物同期饲养在一个设施内，则必须应用更有用的物理屏蔽如具有孤苦透风系统的饲养不雅察开导，以及选择可防交叉沾污的措施分辩供应两种级别动物饲养和实验所需物品如饲料、垫料、饮水等，确保SPF动物的生活环境过火斗争到的一切物品都不会受到清洁级动物的影响，不然和清洁级动物共同饲养在樊篱设施内的SPF动物只可左迁算作清洁级动物使用。

2.饲养微环境  动物实验中，对动物进行径直操作的时辰很少，大多数时辰用作实验不雅察，饲养要求算作实验处理之外的因素，极大影响简直验中动物的活命质地和福利情状。有些实验对饲养要求有着特殊要求，如限量采食、单笼饲养等。一般情况下，应参照连络国度圭臬和不同动物的饲养范例，阐明动物福利的原则匹配饲养要求。

(1)笼具：笼具的匹配包括笼具弃取和使用。笼具主若是阐明不同动物的行为习性、生活民风想象的，体现时高度、宽度、深度、配件等要素上，应使用和动物种类匹配的圭臬化笼具，如小鼠笼、犬笼等，匹配不适当可能会酿成动物行动受限、躯壳挫伤、物化或逃遁。笼具的材质应便于实验不雅察和操作，如透明的 PVC笼盒很容易从外部不雅察动物情状而不会打扰动物；同期接洽外界环境对笼内环境的影响，如金属栅栏笼也很容易不雅察动物，但其里面环境如温度、光照、透风都容易受到笼外环境的影响。

笼具的底部约略有实地和网底两种局面，前者便于动物行走、趴伏，故意于笼内的保温，不外需要使用垫料，后者可容动物排泄物当然落下，无需垫料，但容易导致动物足部劳损等问题，局部保温性能也较差，平素实验弃取实地笼，但当实验需要不雅察动物排泄物或阴栓之类的实验盘算，或需要抹杀垫料粉尘对呼吸说念的潜在影响、垫料或者粪便被迫物采食的可能等，网底笼是更合适的弃取。托盘式网底笼弃取可单独取出的托盘选择动物的排泄物，但积存的排泄物会使空气中臭气物资浓度以及湿度增高，为此不错在托盘中放入吸附性较好的垫料。冲水式的网底笼下有可冲洗的水槽，大致实时撤退动物的排泄物，由于用水量大，且会酿成较高的相对湿度，平素用于普通级动物的实验中。

弃取普通笼具照旧净化笼具应连合实验环境的要求，如需防护空气的交叉沾污时，可弃取净化笼具。代谢笼是特地用于不雅察测定动物代谢情状的笼具，想象上更多接洽实验不雅察和样品收罗的需求，不宜用作惯例饲养。笼具需要进行正确的装配，幸免笼盒笼盖和配件“张冠李戴”而影响使用成果，如期清洗和灭菌是笼具使用的基本要求，高压蒸汽灭菌是最理思的灭菌样式，不耐高温的笼具可选择消毒液浸泡等措施。

(2)垫料：在弃取垫料时，当先接洽是否使用垫料，其次是垫料的种类，终末是垫料的灭菌。

用于各样笼具的垫料可阐明材质和大小进行分类分级，多样材质和规格都有不同性格，如对臭气的吸附性能、吸湿性能、保温性能、优柔度、黏附性、结团性、动物喜好度等，现时国内最常用的是木质刨花垫料，其具有优良的吸湿保和睦吸附性能，况兼比较优柔蓬松，适合动物钻越，选用适当的方法和规格则壅塞易黏附在动物眼、生殖器外周等体表部位，但木质刨花容易产生粉尘，可颖悟扰呼吸说念相干磋议，使用前应除尘。此外，需要着重木质刨花材质的安全性，芳醇性软质木柴如红松、白松、红杉等开首的垫料可开释蒸发性碳氢化合物，骚动肝微粒体酶系并具有其他毒性，对药动学、毒动学磋议有彰着骚动，还可能影响动物生息，应幸免使用。玉米芯垫料贬责了粉尘问题，现时较多用于孤苦透风净化笼具，但其吸附、吸湿、保温性能以及价钱因素制约了其广博扩充。其他用于笼具的垫料材质还有纸质的、蒲草的等。干草是常用于圈舍的垫料，一般不需另外加工。

垫料都应消毒、灭菌后提供给动物，以去除其中搀杂的寄生虫、野天真物排泄物等有毒无益因素，一般弃取预真空的高压蒸汽灭菌，商品化的灭菌垫料有高压灭菌和辐射灭菌的，可径直使用，适合败落相应灭菌要求的实验室。

(3)饲养样式：实验动物饲养样式有笼养和圈养，绝大多数实验都弃取笼养样式，猪和羊偶然会圈养。由于受到笼子大小的限定，体型中等或较大的实验动物笼养时行为空间微弱，其引诱量减少，当实验周期较永劫，需要适当赐与到笼外引诱的契机，如笼养的犬可安排每天定时出笼行为。

(4)饲养密度：阐明最小饲养单位(笼、圈、室)中的动物数量，可将饲养密度分为单独饲养、成对饲养和群饲(3只以上)，细则饲养密度需要接洽笼具或圈舍的大小、实验分组、动物的群居性格、实验不雅察要求等。多数实验动物都是群居动物，3～5只的群饲是最常用的饲养密度。细则每笼或每圈内饲养动物数的主要依据是确保动物最小生活空间，不错参考国度圭臬以及笼具分娩商提供的提出饲养数量。单独饲养是一种比较特殊的饲养密度，严格的单独饲养应是动物处于无法与其他动物交流的状态，常在需要抹杀动物相互骚动的磋议中使用，如一些手术后的不雅察等，有的动物如小鼠具有较强的群居需求，较永劫辰单独饲养容易导致精神荒谬，比较之下，大鼠较能耐受单独饲养，但也会出现愈加警醒的发达，对雌性大鼠平素保举弃取群养样式。猫是个例外，由于猫的孤苦性很强，一般都弃取单独饲养。成对饲养顺应以1：1进行生息实验的磋议需要，一般情况下不接洽。

(5)社会环境：饲养密度和动物所处的社会环境有着密切连络。成对饲养或群饲时，大多数啮齿类、犬以及猴等都能速即形成一定的社会等第，由于社会地位和关系会对动物的身心带来特定影响，由此酿成群体中每个动物在行为和实验反应中的一定相反。同性别动物成对饲养时，其中1只动物处于主导或上风地位，而另一只则处于隶属或颓势地位，偶然容易激发动物的争斗或导致两者反应相反增多。群居动物的单独饲养可能酿成滋长发育和面貌等方面的问题。在动物实验中，社会环境是一种较荫藏的骚动因素，磋议中应尽可能为动物提供与其天性相符的社会环境。

3.饲喂要求

(1)饲料种类和给饲器用：弃取自然原料加工而成的多样动物全价养分颗粒饲料是动物实验中的最好弃取，从养分学角度，圭臬化的全价养分相助饲料具有全面平衡的养分要素，如豚鼠和兔的饲料中含有较高比例的粗纤维以顺应其草食动物的生理需求；从物感性状角度，其具有精采的好意思味性以及合乎动物采食民风的方法，如大鼠、小鼠的饲料具有适合其啃咬的硬度和颗粒方法，颗粒饲料也便于储存和饲喂，并能防止动物挑食。

现时，大鼠、小鼠、豚鼠、地鼠、兔、犬和猴的相助饲料养分要素均可参照国度圭臬，由于要素和卫生情状难以贬抑，不提倡克己饲料用于实验时代动物的惯例饲养。大鼠和小鼠的全价养分颗粒饲料商品化分娩供应已很熟识，犬也有商品化的全价颗粒饲料，豚鼠、地鼠和兔在使用商品化颗粒饲料的同期，平素还需要补充簇新的青绿饲料以保管健康，猴需要在饲料之外补充生果、果汁等，簇新的青绿饲料、生果不错提供丰富的维生素C和纤维素，从而自尊动物对养分素的特殊需求(如猴、豚鼠需要额外补充维生素C)以及完成动物在摄食中的天性如咀嚼。实验用猪和羊尚无饲料圭臬，不错参考衍生业的要求。猫的实验动物化程度较差，为便于实验中的饲料品性贬抑，可使用各品牌市售猫粮，但不宜经常更换品牌和种类。

清洁级以上动物应使用灭菌饲料。现时商品化的实验动物饲料按灭菌处理分为高温灭菌和辐射灭菌两种，前者饲喂前须进行预真空高压蒸汽灭菌，后者还是过辐射灭菌可径直饲喂，因此更适合败落高温高压灭菌要求的实验室。如实验需要自行配制饲料时，也应着重饲料的清洁卫生与动物等第和实验环境匹配。

颗粒饲料平素弃取和笼具配套的饲料槽供给，有的与笼盖连成一体，犬和猫常用饲料盆。对容器的要求是能防饲料被迫物沾污或糜费。需要精准贬抑养分要素的实验中，可用经提纯细密的原料或径直使用皎洁化合物配制饲料，平素配制成液体饲料、凝胶饲料或者粉状饲料，并使用适合其物感性状的特殊给饲器用。

(2)饮水种类和给水器用：普通动物可径直供给清洁的自来水，清洁级以上动物则需供给灭菌的清洁自来水或者纯化水，pH3.0～3.5的酸化水可用于清洁级以上动物，但可颖悟扰动物的生理生化测定收尾。

实验动物常用的给水器用主要包括水瓶、水盆、管说念给水系统。对给水器用的要求包括大致保持饮水的清洁、便于不雅察水量的消耗、无暴露或泼洒、便于清洁消毒又不易糟塌等。带吸管(水嘴)的透明塑料水瓶适合大多数实验，此种水瓶可用于全部种类的饮水，况兼动物很容易学会从水嘴中吮吸，但需要弃取合适的大小(容量)。水瓶的容量以一次灌装(4/5瓶)能自尊动物3天傍边的饮水需求为宜，这是基于水瓶更换责任量以及瓶内水质变化而细则的，大鼠、小鼠的水瓶常用250ml和500ml的规格，许多笼器用配备特地匹配的水瓶，简化了对水瓶的弃取。灭菌自来水平素连水带瓶一都灭菌(灌装后灭菌)使用，无需灭菌的自来水和纯化水可在清洗消毒后的空水瓶中灌装后径直供给动物饮用。管说念式给水需要建立特地的给水系统，现时多用于纯化水，将饮水通过管说念径直接入动物笼舍，可免去换水以及对容器的清洗、消毒、灭菌等责任，在饮水头安装水量监控安装还可监测动物的饮水量。水盆中的水容易受到外界环境的沾污，也容易泼洒，正逐渐被淘汰，可用于无法通过吮吸饮水的动物。

(3)饲喂样式：饲喂样式的弃取需要兼顾动物的采食民风和实验的规定。饮水的供给平素没偶然辰和量的限定，应随时向动物提供饱和的饮水。在饲料的赐与中，无极端规定时，大鼠、小鼠、豚鼠、地鼠都弃取不定量、不限时的摆脱采食，一次性赐与动物可保管2～3天的饲料和饮水并每天不雅察、添加或更换即可。兔、犬、猫一般弃取定时定量的饲喂样式。

(三)实验类型、方法和本领的细则

1.急性实验和慢性实验急性实验和慢性实验是两种十足不同而互为补充的实验类型。急性实验用时短，对实验中多样因素较易从质和量两方面已毕贬抑，东说念主力和物力销耗少，资本较低，但动物处于失常的生理状态，其反应弗成表现在生理要求下的功能与行为规定。慢性实验中的动物处于比较接近正常的生活状态，大致保持机体与外界环境的和洽性，不外费时忙活，资本较高，而且对实验因素的贬抑难度也较大。弃取急性实验照旧慢性实验，应阐明具体的实验要求来细则。

2.实验方法和本领的弃取与优化  动物实验方法和本领决定了对动物的径直操作，磋议者依靠这些方法和本领执行实验处理与获取不雅察盘算。淹没实验方法可能弃取不同的本领来已毕。对实验方法和本领的弃取应辞退动物实验的3Rs原则，尽可能应用3Rs的方法和本领。

阐明应用鸿沟，可将动物实验本领约略分为两大类：惯例实验本领和特殊实验本领。捕捉、保定、个体符号、一般道路给药(受试物)、惯例生物样品辘集、正法等是简直每个动物实验中都会用到的惯例实验本领，多样手术、特殊道路的给药和特殊生物样品的辘集则属于特殊实验本领限度。尽管动物实验本领种类宽绰，且恒久跟着磋议的需要而发展，但每项本领都有各自的应用目的和鸿沟，这即是本领弃取的主要依据。当有多项本领均不错达到不异目的时，必须进一步接洽动物的种属和个体情状，连合实验具体要乞降操作主说念主员的现实水平弃取最得当的本领，在此前提下，还应当接洽本领的优化，以便在获胜完成实验磋议的基础上，将该操作对动物的挫伤和应激降至最低。

实验本领的优化有两层涵义：用更优化的新本领代替原来领，或者翻新原有本领使之更有用率、对动物挫伤更小。对实验操作主说念主员而言，前者意味着对优化本领的弃取，后者则意味着修订应用。新本领的开发和考据由特地的实验室进行并需要广博进入。现时，尽管各样非斗争式测定本领的磋议热热闹闹，但许多尚未能扩充，在磋议中不得贸然使用败落考据或考据不可靠的新本领。对实验本领的翻新平素是一些值得扩充的个东说念主或实验室训戒，如从小鼠尾部进行微量采血时，由于赓续时辰较短，平素仅对尾部固定便可操作，就不必使用全身固定安装，减弱对小鼠的面貌刺激；用软布避讳一些动物的眼睛可匡助其在实验操作中保持适意和松弛，从而减少对其躯体的限定。不错将这些修订本领进一步圭臬化，以普及扩充利用价值。

(四)实验的季节日夜和周期

在细则实验开展的季节、日夜和实验周期时，除了磋议本人特色和需求外，动物的生物节奏亦然需要接洽的焦虑因素。动物的许多生物学功能随季节、日夜或其他因素如气节等呈现存规定的变化，如巴比妥钠对大鼠的麻醉逃避期和麻醉保管时辰在春秋两季有彰着的不同，家兔、犬和小鼠的发射明锐性都随季节而变化，许多基础生理盘算如体温、血糖、外周白细胞计数、基础代谢率、神经内分泌等都有彰着的日夜节奏，在实验周期跨季度时，或者需要在一天中不同时代进行实验不雅察和盘算测定时，均需要鉴别和防止生物节奏的骚动作用。

实验周期的细则还和动物寿命连络，由于不同实验动物寿命不同，不异的实验周期在寿命较短的动物和寿命较长的动物中具有不同意旨，如进行为期1年的耐久毒性实验，在大鼠(寿命约2.5年)涵盖了一世的大部分生命阶段真实迷奸女高中生，但在犬(寿命约15年)则只可反馈一个特定阶段的情况。

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